- Escorpião
- Rino (Marvel Comics)
- Venom (Marvel Comics)
- Lagarto (Marvel Comics) (Não é um dos chefões do Jogo mas dá informações de onde Mary Jane está presa)
- Mysterio
- Doutor Octopus
- Carnificina
- Monstro Octopus (mistura do Doutor Octopus e do Simbiote do Carnificina) que não existe nos quadrinhos sendo uma variação exclusiva para o jogo.
- Sindicato de Jade (Mercenários do banco)
Vilões que aparecem no jogo
